為什麽蛋白MARKER少兩條帶?而且大分子量蛋白少而弱呢?

2016-11-28技術資料

為什麽我的蛋白MARKER是4條帶,而樣品大分子量蛋白條帶少呢??

右邊(2孔)是MARKER啊,4條帶呢,依次4.6.8.孔是樣品(牛肉),濃度逐漸增大,大家覺得我這降解了?還是就是沒提出來呢?? 為什麽我的MARKER,少兩條帶呢??而且,大分子量蛋白,少兒弱呢???

牛肉全蛋白檢測圖
 

我也要做SDS-PAGE,還菜鳥一個呢。抱歉,沒法回答樓主。關注中……

 

我前不久也出現了和你同樣的問題,後來發現是我配製的30%的丙稀酰胺有問題,濃度配底了,當時沒有達到30%,你也看看是不是這樣,僅供參考!

 

請問你跑的分離膠的濃度時多少?還有確定marker沒問題嗎?換一個新的marker試試看~~~

 

如果本一條帶變為多條帶,可能是因為有些蛋白質分子沒有充分還原,可增加樣品中的巰基乙醇;或者發生聚集,可加入尿素,促進溶解;或者存在諸多蛋白質碎片,上樣前可以離心。
蛋白質帶丟失或過淡可能是在固定過程中未被變性,增加TCA濃度或者使用戊二醛固定。